De tentoonstelling is het derde en laatste expositieluik over de 16de eeuwse Florentijnse kunst. Schilders uit de tweede helft van de 16de eeuw staan er centraal. Grote culturele rijkdom en intellectuele creativiteit bloeiden volop onder het uitzonderlijk mecenaat van Francesco I de’ Medici en dat van zijn broer Ferdinando I de’Medici. Zowel religieuze als profane schilderijen en beelden worden op de expo getoond.
Vanaf 1561 werd Alessandro Allori de officiële portretschilder van Francesco de’ Medici. Zijn potret uit de collectie van het Museum Mayer van den Bergh, is een treffende getuigenis van Francesco als staatsman in wapenrusting.